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[實例分享] 應對菌落蔓延,TTC的使用方法

放大字體  縮小字體 發布日期:2021-07-23  瀏覽次數:124
核心提示:關于TTC的使用,從剛開始的菌落蔓延,搜索解決辦法,了解TTC之后琢磨使用劑量,可以說是花了一段不短的時間。包括對于TTC的使用,
 關于TTC的使用,從剛開始的菌落蔓延,搜索解決辦法,了解TTC之后琢磨使用劑量,可以說是花了一段不短的時間。包括對于TTC的使用,也可以說“眾說紛紜”,一開始接觸的我真的也是不知道怎么去弄,是很頭疼的,而且遇到菌落蔓延的吧友還是挺多的。


好了,廢話說到這,進入正題:

首先,TTC有毒,不僅毒細菌也毒人,所以使用的時候要小心(其實用別的化學試劑也要小心,不好意思,又說廢話了)。接著我個人是配置的0.5%的TTC溶液,你們可以根據個人的需要配置不同濃度。

配置方法:實驗室用水(我們用的桶裝純凈水)200mL,TTC粉末1.00 g,水不用滅菌,我個人是稍微加熱(大概40℃水溫這樣就完全溶解了),也可以攪拌至完全溶解,然后倒入棕色瓶子,放無菌室靜置大概72小時(我個人是放置72小時,不確定24小時或者48小時行不行),此時配置出來的溶液加入空白培養基是養不成菌落的(我覺得這也說明了這東西有毒)。沒必要先把水滅菌,也沒必要加入PDA培養基里一起121℃滅菌。

使用劑量:我一般是500mL PDA培養基 配 2.0mL 的 0.5%TTC 溶液,在無菌室里操作,在倒平板之前加,搖晃均勻就可以,本人親測,對解決菌落蔓延問題非常有效,而且也不會有明顯的抑制細菌生長導致實驗不準確的情況。

溫馨提醒:放置條件:避光低溫保存(我是室溫保存的,化驗室經常開空調,大概在20-25℃左右,(下班了就25-30℃左右),目前放置了一個多月,沒有出現粉紅色。我查找資料的時候,說是溶液呈粉紅色就要從新配置了圖片。

 

小結

目的 : 為便于區別樣品顆粒與菌落,可在每 100mL 瓊脂培養基中加入1 mL、 0.5% 的 TTC 溶液,如有細菌存在,培養后菌落呈紅色。

配制 : TTC 0.5g,蒸餾水 100mL,溶解。定性濾紙過濾,濾液置于棕色瓶中,4°C冰箱冷藏 。

滅菌 : 配好的0.5% TTC,  過濾除菌后置于棕色瓶中4°C冰箱冷藏 ; 或按預計使用量分裝入小管,115℃高壓滅菌 20min 、121度高溫滅菌15min,過后4°C冰箱冷藏。

使用 : 臨澆平板前,再按前述比例將TTC與培養基混合搖勻。

 


只是分享經驗,數據結論僅代表我自己親身試驗得出的較合理結論,不具備權威性哦!

 

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編輯:songjiajie2010

 
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