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絕對干貨—微生物日常檢驗過程中的注意事項!

放大字體  縮小字體 發布日期:2017-03-24  來源:食品實驗室服務公眾號  瀏覽次數:6687
核心提示:微生物檢驗過程中的細節問題匯總。。。
一、培養基的滅菌及使用

(1)每次配置時,要注意其生產日期是否在保質期內,查看其開瓶日期及瓶口密封性,保證其未變質,并且未吸潮。
(2)培養基配置時,稱量要準確,包括鹽水的分裝要準確。
(3)一定要保證現配制現滅菌,未滅菌的配好培養基不能長時間放置,更不可隔夜。
(4)滅菌時要保證恒溫、恒壓,同時要保證有效滅菌時間。
(5)滅菌過的培養基要冰箱保存,可保存一周,一般不超過 3 天。而且要遵循“先入先出”原則,先配制的要先使用。
(6)在使用時,要根據當班次的使用量,用水浴鍋先將培養基溶化為液態,然后及時調低水域溫度(先化好的可從水域取出,放在水浴鍋鍋蓋上)待用,千萬不可長時間使培養基處于高溫狀態。
(7)做產品微生物檢測時,傾倒培養基溫度在 45℃左右,不可過燙,避免將菌燙死;也不可過涼,化好的培養基又結塊凝固,不便于觀察結果。
(8)每瓶培養基均要做空白。
(9)盡量集中做樣,避免頻繁打開同一瓶培養基瓶塞,增大培養基的污染幾率,出現誤差結果。
(10)培養基剩余過少時,可先將其傾倒成空白用板。

二、 做樣環境的維持

(1)大環境(房間)
1)做樣時,窗戶和空調要關閉,或用酒精對房間進行噴霧消毒,避免房間內空氣流通影響超凈臺內部環境(最好在有通排風系統的恒溫恒濕無菌間進行操作)。
2)如果在原來的原料微生物檢測室進行做樣,要定期開啟紫外燈,對房間進行殺菌。
(2)小環境(超凈臺)
1)定期清潔初效過濾器,要及時更換。
2)做樣前,將超凈臺內部進行清潔,用 75%酒精進行擦拭消毒,并提前半小時將超凈臺紫外燈打開,對超凈臺內部環境進行殺菌。
3)關紫外燈,開風機,調整合適進風量,風量不可過低。
4)每次做樣后,要對超凈臺內部進行清理、清潔,并用 75%酒精進行擦拭消毒。
5)紫外燈根據其使用壽命要及時更換。
6)做樣同時,要做上相應菌落檢測的環境空白。
7)做樣區域的選擇:
a、一般在距離超凈臺外沿的 1/3-2/3 區域進行無菌操作;
b、要在酒精燈火焰的外焰保護區域進行操作。

三、 工器具的潔凈度

(1)玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進行滅菌。
(2)做樣用剪刀、勺子等物品要做到做樣專用,不可與其它操作器具混用,使用時,先用75%酒精消毒,再采用灼燒方式進行滅菌。
(3)接種針(環)采用灼燒方式進行滅菌,但要注意做樣時要先將接種針(環)進行冷卻。

四、樣品的采集及檢測

(1)保證采樣器具的無菌性
1)玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進行滅菌,保證恒溫、時間足夠(但不可時間過長,導致玻璃器皿易裂紋而報廢)。
2)取樣筐:使用前要用75%酒精進行噴灑消毒。
3)取樣勺:要保證其清潔消毒,清潔后用75%酒精進行擦拭消毒。
4)取樣袋:可先用酒精進行擦拭消毒,再在超凈臺用紫外燈照射消毒,(包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒)。
5)電子稱表面用 75%酒精消毒。
(2)人員操作
1)保證手部的清洗、消毒:取樣前及做樣前都要先洗手再消毒。
2)取樣要具有代表性(隨機樣、目的樣、綜合樣)且要標示清楚。
3)取樣完畢,不可在車間逗留,要及時將樣品放入超凈臺,對其外表面進行紫外燈照射消毒。
4)在要求的做樣區域進行操作。
5)做樣前,要用 75%酒精棉球對樣品袋口部進行擦拭消毒,再開口。
6)往鹽水瓶加樣品時,要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。
7)樣品計量要準確,稀釋倍數也要準確(1mL 吸管不允許將管口敲掉),進行 100 倍稀釋時,1mL 吸管要伸入鹽水中,不可以將樣品從管壁流下去,同時要避免將管底部捅破。
8)鹽水溫度以 40℃左右為宜,不能過熱,會將部分微生物燙死;也不能溫度太低,不能將樣品溶解完全。
9)進行稀釋時,要搖勻,保證溶液的均一性。
10)傾倒平皿時,要注意培養基瓶口不要接觸到平皿;傾倒的培養基要適量,不可以太少,在培養過程中干掉,微生物亦死亡,以 15mL 左右為宜。
11)做大腸菌群樣時,要提前將乳糖膽鹽培養基培養管按需要量備好,放入超凈臺對外表面進行紫外線滅菌。
12)接二步時,要注意先將接種針(環)進行冷卻,避免出現接不上菌落的情況發生,導致無法判斷、確認。
13)做樣完畢,及時放入相應培養箱進行培養,并清理清潔超凈臺。

五、 微生物的培養

(1)在培養過程中,要隨時監控培養箱溫度,保證其在適宜的溫度進行培養。
(2)要按照《微生物檢驗規范》要求及時觀察結果,出現異常,要及時分析原因進行反饋。
編輯:foodec007

 
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