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三糖鐵(TSI)瓊脂試驗的原理

放大字體  縮小字體 發布日期:2010-05-13  瀏覽次數:13505
核心提示:  試驗方法:以接種針挑取待試菌可疑菌落或純培養物,穿刺接種并涂布于斜面,置36±1℃培養18~24h,觀察結果! ∪

  試驗方法:以接種針挑取待試菌可疑菌落或純培養物,穿刺接種并涂布于斜面,置36±1℃培養18~24h,觀察結果。

  三糖鐵瓊脂(TSI)成分
  蛋白胨 20.0g
  牛肉膏 3.0g
  乳 糖 10.0g
  蔗 糖 10.0g
  葡萄糖 1.0g
  硫酸亞鐵銨(含6個結晶水) 0.5g
  酚 紅 0.025g或5g/L溶液5mL
  氯化鈉          5.0g
  硫代硫酸鈉        0.5g
  瓊 脂 12.0g
  蒸餾水 1000.0mL
  除酚紅和瓊脂外,將其他成分加入400mL蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10min,加熱煮沸至完全溶解,調至pH7.4±0.1。另將瓊脂加入600mL蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10min, 加熱煮沸至完全溶解。
  將上述兩溶液混合均勻后,再加入酚紅指示劑,混勻,分裝試管(12mm×100mm),每管約2~4mL,高壓滅菌121℃ 10 min或115℃15 min,滅菌后置成高層斜面,呈桔紅色。

  原理分析本培養基適合于腸桿菌科的鑒定。用于觀察細菌對糖的利用和硫化氫(變黑)的產生。該培養基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例為10:10:1,只能利用葡萄糖的細菌,葡萄糖被分解產酸可使斜面先變黃,但因量少,生成的少量酸,因接觸空氣而氧化,加之細菌利用培養基中含氮物質,生成堿性產物,故使斜面后來又變紅,底部由于是在厭氧狀態下,酸類不被氧化,所以仍保持黃色。

 

  而發酵乳糖的細菌(e.coli),則產生大量的酸,使整個培養基呈現黃色。

  如培養基接種后產生黑色沉淀,是因為某些細菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氫,硫化氫和培養基中的鐵鹽反應,生成黑色的硫化亞鐵沉淀。

提問:志賀氏菌都能分解葡萄糖,產酸不產氣,大多不發酵乳糖,不產生H2S。應該產生什么現象?

   大腸桿菌,能分解葡萄糖產酸產氣,大多數能分解乳糖,不產生H2S。應該是什么現象?

   沙門氏菌,能分解葡萄糖,不發酵乳糖,大多數產生H2S,多數產氣。

下面照片所示2-3-4,可能是大腸桿菌、沙門氏菌還是志賀氏菌?

答案:2-志賀氏菌  3-沙門氏菌  4-大腸桿菌

編輯:foodyy

 
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